Uso de PCR en tiempo real para la deteccción de la expresión del canal de potasio BK en muestras de salmón del Atlántico (Salmo salar) y trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) aclimatadas a agua dulce

Resumo

El salmón del Atlántico (Salmo salar) y la trucha arcoíris (Oncorhynchus Mykiss) son especies que se reproducen en agua dulce y durante la smoltificación deben aclimatarse para vivir en agua de mar, gracias a la secreción del exceso de NaCl al ambiente. La industria salmonera utiliza la medición de la actividad de la Na+/K+ ATPasa como marcador molecular para determinar el tiempo de transferencia de los smolts al mar. Sin embargo, la baja precisión de este marcador es un importante problema en la industria. Como el mecanismo molecular de secreción de NaCl en las branquias en peces aclimatados al mar tiene el requisito termodinámico de reciclar el K+ fuera de las células por medio de canales de potasio, nosotros hipotetizamos que canales de potasio expresados en branquias podrían ser candidatos a potenciales nuevos marcadores para monitorear el proceso de smoltificación. En este trabajo se utilizó la técnica de PCR en tiempo real para medir la expresión de ARNm del canal de potasio BK. Se encontró expresión en branquias, riñón e intestino en animales aclimatados a agua dulce, así como también se encontró, de forma interesante, un aumento de la expresión del canal de potasio BK al aumentar la salinidad al día 7 específicamente en branquia. El producto amplificado por PCR en tiempo real es único y su secuencia posee un 98% de identidad con la porción del canal BK descrito en la base de datos del NCBI. Este ensayo de PCR en tiempo real podría ayudar al monitoreo de los cambios de expresión del canal de potasio BK durante la smoltificacion para estudiar si es posible usar este canal como marcador molecular en el futuro.