Análisis de fragmentos de gen expresados diferencialmente en el riñón cefálico del mero malabárico (Epinephelus malabaricus) estimulado con lipopolisacáridos

Resumo

Se estudiaron los efectos inmunológicos y el mecanismo molecular preliminar de lipopolisacáridos (LPS) en el mero malabárico (Epinephelus malabaricus). El mero se inyectó intraperitonealmente dos veces (con 7 días de diferencia) con 4 mg/kg^-1 peso corporal de LPS provenientes de Escherichia coli (grupo de prueba, probadores) o solución de tampón fosfato pH 7,2 (grupo control, conductores). Veintiocho días después, la actividad media de antibacterianos, lisozima y polifenol oxidasa del suero mostraron valores de probador de 0,228, 0,032 y 21,8 U/ml x min, respectivamente, mientras que los valores de controlador fueron 0,200, 0,015 y 15,5 U/ml x min. Se elaboró una librería subtractiva de cDNA del riñón cefálico estimulado con LPS de mero malabárico utilizando hibridación substractiva por supresión. Se seleccionaron y secuenciaron 376 clones de fragmentos de genes expresados de probadores específicos, y se obtuvieron 326 EST calificados. Después de una búsqueda con los programas BLASTn y BLASTx, 312 ESTs mostraron gran similitud para 13 fragmentos de genes (14 ESTs no se asemejaron a ninguno de los genes en el GenBank). De los 13 fragmentos, dos (15,4%) estaban relacionados con inmunodefensa (factor 2 regulador de interferón-proteína de unión 2-A y complejo T de proteínas 1-theta); cinco (38,5%) estuvieron relacionados con la transcripción o la traducción; uno (7,7%) estuvo involucrado en el metabolismo (proteína CT054); dos (15,4%) codificarían homologoproteína de diferenciación, leucemia mieloide y la proteína 3 que contiene el dominio parche G; y tres (23,1%) eran genes de transporte de oxígeno que codifican la cadena α de hemoglobina, la cadena β de la hemoglobina y de la cadena pesada de ferritina. Los resultados mostraron que LPS podrían mejorar significativamente la inmunidad innata y regular la expresión de genes relacionados con la inmunidad, la producción de energía celular, el crecimiento, metabolismo o la resistencia al estrés en mero malabárico. Además, LPS pueden ser utilizados como un inmunoestimulante eficaz para esta especie, proporcionando una visión de los mecanismos de los efectos de LPS en animales acuáticos a niveles serológicos y moleculares.