Concentración del virus de la necrosis pancreática infecciosa mediante ultrafiltración de flujo tangencial combinado con filtración de exclusión

Resumo

El virus de la necrosis pancreática infecciosa, virus IPN, es el agente causal de una enfermedad altamente contagiosa que afecta principalmente a peces jóvenes. El virus IPN se transmite mayoritariamente en forma horizontal, por lo cual la cuantificación del virus en el agua es fundamental para un adecuado manejo sanitario de la industria del salmón y del medio ambiente vecino a los sitios de cultivo. Con el fin de establecer el potencial riesgo del agua contaminada con virus IPN es necesario determinar la cantidad de virus activo mediante un procedimiento de detección con la adecuada sensibilidad para cuantificarlo en sus niveles de riesgo mínimos. Para contribuir a satisfacer esta necesidad es que se desarrolló una metodología que permite concentrar al virus desde el agua mediante la combinación de dos tipos de ultrafiltración. Uno basado en el flujo tangencial de la muestra por la superficie de una membrana concentradora y el otro basado en la retención de las partículas virales en la superficie de membranas de poro controlado. Se seleccionaron soluciones y condiciones de aplicación para minimizar la inactivación del virus y/o su unión a los filtros. Finalmente se establece un protocolo mediante el cual es posible concentrar mil veces al virus y con una recuperación total de la infectividad. La aplicación del método no tarda más de un día incluyendo la titulación del virus mediante la técnica de los focos fluorescentes.